Oxidasa.

Prueba utilizada para la detección de la enzima citocromo-c-oxidasa, presente en los géneros Pseudomonas, Neisseria, Moraxella, Vibrio, Aeromonas, entre otros.

Fundamento
Los discos contienen oxalato de dimetil-para-fenilendiamina, el cual es el sustrato de la enzima oxidasa.
Los microorganismos que producen la enzima oxidasa se evidencian porque en presencia de oxígeno atmosférico y citocromo c, se oxida el sustrato presente en los discos a un compuesto de color rojo-fucsia.

Metodología

Siembra
- En tubo: a partir de un cultivo puro, hacer una suspensión densa en 0.2 ml de agua destilada estéril, y agregar un disco de OX.
- En portaobjetos: humedecer el disco de OX con una gota de agua y luego colocar sobre él la colonia en estudio.
(ésta metodología se realiza cuando se tiene escaso número disponible de colonias en estudio).

Incubación
Generalmente dentro del minuto, y a temperatura ambiente se detectan los resultados positivos. Una reacción lenta, pasado los 2 minutos, debe considerarse negativa.
Utilizar como control positivo Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, y como control negativo Escherichia coli ATCC 25922.

Resultados
Positivo: observación de color rojo-fucsia en el disco y/o solución.
Negativo: el disco permanece sin cambio de color.

Microorganismo

Oxidasa

Pseudomonas aeruginosa

+

Neisseria spp.

+

Aeromonas spp.

+

Vibrio spp.*

+

Moraxella

+

Familia Enterobacteriaceae

-


EJEMPLO:
* V: metschnikovil y V. gazogenes son oxidasa (-)

Limitaciones
- La prueba debe realizarse utilizando cultivos frescos (18-24 horas), y que no provengan de medios con azúcares con pH ácido.
- No usar ansas de nichrome (sólo si son nuevas) por riesgos de obtener resultados falsos positivos provenientes del metal reducido. Se recomienda utilizar una varilla de vidrio, plástico o madera.

Almacenamiento
- Guardar los discos al abrigo de la luz.
- Conservar a 2-8 °C

Presentación 

X 25 Discos     

B12-403-24