Colibritania.
Método rápido para la detección de Escherichia coli a partir de urocultivos.
Fundamento
Escherichia coli es la responsable del 90% o más, de las infecciones urinarias en el medio ambulatorio y cerca del 60% de las IU intrahospitalarias. Por ello, es oportuno disponer de un método rápido, específico y sensible para su identificación, basado en la detección de las enzimas b- D-glucuronidasa y triptofanasa, las cuales están presentes en el 94-96 % de las cepas.
Los discos están embebidos con p-nitrofenil-glucurónido y con triptófano, sustratos de la enzima b- D-glucuronidasa y triptofanasa respectivamente.
Por acción enzimática sobre p-nitrofenil-glucurónido se libera p-nitrofenol, que es un compuesto de color amarillo, y por acción enzimática sobre el triptófano se libera indol, el cual será revelado.
Metodología
Siembra
A partir de un cultivo puro en medio C.L.D.E., hacer una suspensión densa en 0.2 ml de agua destilada estéril, pH:7, y agregar un disco de Colibritania.
Incubación
-Durante 4 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.
Importante: si se sospecha la presencia de E. coli, y no se observa viraje de color a las 4 horas, incubar 2 horas más.
- Observación del color de la suspensión
- Prueba del Indol
- Agregar 4 gotas de reactivo indol,observar el color.Resultados
A-Prueba de la b- D-glucuronidasa
Positiva: observación de color amarillo en la suspensión.
Negativa: la suspensión permanece sin cambio de color.
B- Prueba del Indol
Positiva: aparición de un color rosado.
Negativa: sin cambio de color.
Microorganismo
Betaglucuronidasa
Indol
Escherichia coli ATCC 25922
+
+
Escherichia coli O157 H7 ATCC 700728
-
+
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
-
-
Proteus mirabilis ATCC 43071
-
-
Limitaciones
- Se puede realizar la prueba a partir de diferentes muestras, pero tener la precaución de no realizarla a partir de medios de cultivo de color rosado-rojo, por riesgo de producir interferencias en la interpretación de resultados.
- Junto con la realización de la prueba, se recomienda usar control positivo y negativo.
- Algunas cepas de Salmonella spp. y Shigella spp. presentan la enzima b-D-glucuronidasa.
- El 94-96% de las cepas de E. coli, posee la enzima β-glucuronidasa.Almacenamiento
Guardar los discos al abrigo de la luz.
- Conservar a 2-8 °C .
Presentación
X 25 Discos *
B12-405-24
* Incluye Reactivo Indol