Caldo m-Endo.
Desarrollado para el recuento de coliformes totales en agua, bebidas y otras muestras por medio de la técnica de filtración por membrana.
Fundamento
En el medio de cultivo, la pluripeptona junto con la peptona, la tripteína y el extracto de levadura, aportan los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable. El fosfato dipotásico y el fosfato monopotásico otorgan la capacidad buffer, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Es un medio selectivo debido al lauril sulfato de sodio y al desoxicolato de sodio que inhiben el desarrollo de la flora acompañante, y es diferencial debido a la fermentación de la lactosa.
Las bacterias fermentadoras de lactosa producen durante la fermentación aldehídos, que en combinación con la fucsina y el sulfito presentes en el medio le confieren a la colonia un brillo metálico, mientras que las colonias de las no fermentadoras son rosadas.
Fórmula (en gramos por litro)
Pluripeptona
10.0
Peptona
5.0
Tripteína
5.0
Extracto de levadura
1.5
Lactosa
12.5
Cloruro de sodio
5.0
Fosfato dipotásico
4.375
Fosfato monopotásico
1.375
Lauril sulfato de sodio
0.05
Desoxicolato de sodio
0.1
Sulfito de sodio
2.1
Fucsina básica
1.05
pH final: 7.2 ± 0.2
Siembra
- Filtrar la muestra a analizar. El volumen que se filtra depende de la probable contaminación de la muestra.
- Embeber la almohadilla con el caldo m-Endo hasta la saturación (la cantidad de medio de cultivo depende del grado de absorción de la misma).
- Apoyar la membrana filtrante sobre la almohadilla embebida con el medio de cultivo.Incubación
Incubar las placas a 35-37 °C por 24 horas. Ocasionalmente, los microorganismos no coliformes pueden producir brillo metálico. Para confirmar las colonias sospechosas, transferirlas a tubos con caldo verde brillante y bilis al 2%, con campanitas de Durham. Incubar los tubos por 24-48 horas a 35-37 °C. Los coliformes habrán producido gas por fermentación de la lactosa, al cabo de ese período.Resultados
El recuento debe realizarse en aquellas placas que contengan entre 20 y 80 colonias y no más de 200, ya que se trata de un medio selectivo.
La concentración microbiana debe expresarse como el número de microorganismos presentes en 100 ml de muestra.
Recuento de colonias =
N° de colonias X 100
ml de muestra filtrada
Microorganismos
Crecimiento
Características de las colonias
Escherichia coli ATCC 25922
Bueno
Brillo metálico
Proteus mirabilis ATCC 43071
Bueno
Incoloro
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inhibido
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Limitaciones
Ocasionalmente, los microorganismos no coliformes pueden producir brillo metálico, por lo que se considera necesario realizar la confirmación bioquímica.Características del medio
El medio puede presentar turbidez y/o un ligero precipitado.Almacenamiento
Las ampollas deben conservarse entre 2 y 8 °C.
Presentación
X 30 amp *
B06-212-33
X 10 ml
B06-165-60
* Cada ampolla sirve para una determinación