Violeta Rojo y Bilis Glucosa Agar.
Medio de cultivo utilizado para la detección y el recuento de enterobacterias totales, a partir de alimentos.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano,las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora acompañante Gram positiva, la glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH.
Todas las enterobacterias fermentan la glucosa, esto produce la acidificación del medio y el viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Peptona de carne
7.0
Suspender 41,5 g del polvo por litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar a ebullición hasta disolución total. NO AUTOCLAVAR.
Extracto de levadura
3.0
Cloruro de sodio
5.0
Glucosa
10.0
Mezcla de sales biliares
1.5
Rojo neutro
0.03
Violeta cristal
0.002
Agar
15.0
pH final: 7.3 ± 0.2
Siembra
- Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestra directa o de la dilución apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45 ºC, agitar por rotación y dejar solidificar.
Luego, agregar una sobrecapa de medio de cultivo para crear condiciones anaeróbicas de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram negativos no fermentadores de azúcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp.
- Para propósitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con gas de un medio para coliformes.Incubación
A 35-37 ºC durante 18-24 horas, en aerobiosis.Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Producción de pigmento
Escherichia coli ATCC 25922
Bueno
Rojo púrpura
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Bueno
Rojo púrpura
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inhibido
---
Características del medio
Medio preparado: púrpura rojo.Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-172-05
x 500g :Código: B02-172-06