Ureasa Medio para la prueba

Medio utilizado para la identificación de microorganismos, en base a la actividad ureásica.
Es particularmente útil para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.

Fundamento
Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer.
El extracto de levadura es la única fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfatos constituyen el sistema buffer, el rojo de fenol es el indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa.
Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno proveniente de la urea, la hidrolizan, liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos metabólicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador rojo fenol del amarillo al rojo.
Su uso, se recomienda para diferenciar Proteus spp. de otros géneros.
Para organismos que hidrolizan la urea lentamente, es recomendable usar el medio de Christensen (B02-109-05, B02-109-06).

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Urea	20.0	Suspender 3, 87 g del medio deshidratado por cada 100 ml de agua destilada. Disolver sin calentar y esterilizar por filtración. Distribuir en tubos pequeños estériles, entre 0,5 y 2 ml.
Fosfato monopotásico	9.1
Fosfato disódico	9.5
Extracto de levadura	0.1
Rojo fenol	0.01
pH final: 6.8 ± 0.2

Siembra
Sembrar un inóculo denso a partir de un cultivo puro de 24 horas.

Incubación
A 35-37 ºC, en aerobiosis. Observar las reacciones a las 8, 12,24 y 48 horas de incubación.
Para aquellos microorganismos que hidrolizan lentamente la urea, incubar hasta 72 horas.

Resultados

Microorganismo	Actividad ureásica	Color del medio
Proteus mirabilis ATCC 43071	Positiva	Rojo-rosado
Escherichia coli ATCC 25922	Negativa	Amarillo
S. flexneri ATCC 12022	Negativa	Amarillo
S. typhimurium ATCC 14028	Negativa	Amarillo

Limitaciones
-La gran capacidad buffer de este medio de cultivo, puede enmascarar la actividad ureásica en bacterias que hidrolizan lentamente la urea.
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone facilmente.

Características del medio
Medio preparado: anaranjado.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-148-05	x 500g :Código:  B02-148-06