Mueller Hinton Caldo


Este medio ha sido recomendado universalmente para la prueba de sensibilidad de los antimicrobianos en medio líquido.

Fundamento
Medio nutritivo adecuado para facilitar el crecimiento de numerosos microorganismos.
Al igual que su presentación en forma de agar, el caldo Mueller Hinton muestra buena reproducibilidad de los resultados lote a lote, tiene un bajo contenido de inhibidores especialmente para sulfamidas, trimetoprima y tetraciclina. Puede ser suplementado para el crecimiento de bacterias exigentes y con ciertos cationes para el antibiograma de Pseudomonas frente a aminoglucósidos.

Fórmula (en gramos por litro)
Infusión de carne	300.0
Peptona ácida de caseína	17.5
Almidón	1.5
pH final: 7.3 ± 0.2

Instrucciones
Suspender 22 g del medio en un litro de agua destilada y dejar embeber 10 minutos, agitando periódicamente. Calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto. Distribuir en tubos, esterilizar a 121°C por 15 minutos. Si se desea utilizar caldo de Mueller Hinton suplementado con Ca²⁺ y Mg²⁺ ajustar a una concentración final de 20 a 25 mg de Ca²⁺/l y 10 a 12,5 mg de Mg²⁺ por litro especialmente cuando se desea realizar la CIM de Pseudomonas aeruginosa a aminoglucósidos o evaluar tetraciclina para todas las bacterias. Ajuste de cationes: el procedimiento para preparar la solución stock de magnesio, se realiza disolviendo 8,36 g de Mg Cl₂ 6H₂O en 100 ml de agua desionizada. Esta solución contiene 10 mg de Mg²⁺/ml. Para preparar la solución stock de calcio se disuelve 3,68 g de Ca Cl₂ 2H₂O en 100 ml de agua desionizada, esta solución contiene 10 mg de Ca²⁺/ml. Las soluciones stock se esterilizan por filtración por membranas y se conservan a 4°C. El caldo Mueller Hinton se prepara de acuerdo a las instrucciones anteriores y se enfría a 4°C; con agitación se le agrega 0.1 ml de cada una de las soluciones anteriores stock por litro de caldo, cuando se desea incrementar la concentración final de Calcio y Magnesio en 1 mg/litro.


Siembra
Consultar en bibliografía de referencia: “Documento NCCLS M7-A6, volumen 23 Nº 2, Enero 2005”, la metodología apropiada.


Incubación
Consultar en bibliografía de referencia: “Documento NCCLS M7-A6, volumen 23 Nº 2, Enero 2005”, la metodología apropiada.


Resultados
Consultar en bibliografía de referencia: “Documento NCCLS M7-A6, volumen 23 Nº 2, Enero 2005”, la metodología apropiada.

Notas:

1-Los lotes de caldo Mueller Hinton Britania cumplen con las normas NCCLS.
2-Las determinaciones de la CIM deben realizarse según procedimientos estandarizados usando las siguientes cepas controles:

E. coli	ATCC 25922
P. aeruginosa	ATCC 27853
Staphylococcus aureus	ATCC 29213
Enterococcus faecalis	ATCC 29212
E. coli	ATCC 35218

Este último microorganismo se recomienda para el control de combinaciones con inhibidores de betalactamasa tales como ácido clavulánico o sulbactama.

Características del medio
Medio preparado: ámbar.


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-169-05	x 500g :Código:  B02-169-06