M.R.S. agar.

El Agar M.R.S. fue desarrollado por Man, Rogosa y Sharpe para proveer un medio que pudiera evidenciar un buen crecimiento de lactobacilos y otras bacterias ácido lácticas

Fundamento
El medio de cultivo permite un abundante desarrollo de todas las especies de lactobacilos. La peptona y glucosa constituyen la fuente de nitrógeno, carbono y de otros elementos necesarios para el crecimiento bacteriano. El monoleato de sorbitán, magnesio, manganeso y acetato, aportan cofactores y pueden inhibir el desarrollo de algunos microorganismos. El citrato de amonio actúa como agente inhibitorio del crecimiento de bacterias Gram negativas.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Proteosa peptona Nº 3	10.0	Suspender 64 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullición durante 1 ó 2 minutos. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121 ºC.
Extracto de carne	8.0
Extracto de levadura	4.0
Glucosa	20.0
Monoleato de sorbitán	1 ml
Fosfato dipotásico	2.0
Acetato de sodio	5.0
Citrato de amonio	2.0
Sulfato de magnesio	0.2
Sulfato de manganeso	0.05
Agar	13.0
pH final: 6.4 ± 0.2

Siembra
-Por inoculación directa del material a analizar.
-Técnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de la muestra y agregar aproximadamente 15 ml del medio de cultivo fundido y enfriado a 45-50 ºC. Mezclar por rotación, dejar solidificar.


Incubación
En atmósfera aeróbica con 5-10 % CO₂, a 35-37 ºC hasta 3 días ó a 30 ºC hasta 5 días.

Resultados
Características de las colonias: generalmente pequeñas, blanco-grisáceo, lisas o rugosas.

Microorganismos	Crecimiento
Lactobacillus fermentum ATCC 9338	Bueno
Lactobacillus gasseri ATCC 33323	Bueno

Características del medio
Medio preparado: amarillo.

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 2-8 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-205-05	x 500g :Código:  B02-205-06