Mac Conkey Caldo.
Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigación presuntiva de microorganismos coliformes en aguas, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona es la fuente de aminoácidos y de otros factores de crecimiento, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la bilis de buey estimula el crecimiento de las bacterias coliformes e inhibe a gran parte de la flora gram positiva, y el púrpura de bromocresol es el indicador de pH.
Los coliformes, son microorganismos que fermentan la lactosa, con producción de ácido y gas. Al acidificar el medio, se produce un viraje del indicador de pH del color púrpura al amarillo.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Bilis de buey
5.0
Suspender 35 g de polvo por litro de agua destilada. Disolver y distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Peptona
20.0
Lactosa
10.0
Púrpura de bromocresol
0.01
pH final: 7.3 ± 0.2
Siembra
Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Probable:
Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración.
Número
de tubosVolumen
de la muestraVolumen de medio
Concentración del medio
3
10 ml
10 ml
Doble
3
1 ml
10 ml
Simple
3
0.1 ml
10 ml
Simple
Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efectuar diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución por triplicado en medio de cultivo simple concentración.
Número
de tubosDilución de la muestra
Volumen de la muestra
Volumen de
medioConcentración del medio
3
10-1
1 ml
10 ml
Simple
3
10-2
1 ml
10 ml
Simple
3
10-3
1 ml
10 ml
Simple
Incubación
Incubar los tubos 24-48 horas a 35-37 °C.Resultados
Se considera resultado positivo el viraje al amarillo del color del medio y la producción de gas
Microorganismos
Crecimiento
Producción
de gasEnterobacter aerogenes
Bueno a excelente
+
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Bueno a excelente
+
Escherichia coli ATCC 25922
Bueno a excelente
+
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Bueno a excelente
-
Expresión de resultados:
Para muestras de fluidos expresar el NMP por 100 ml de muestra, y para muestras sólidas, expresarlo por gramo de producto.Características del medio
Medio preparado: púrpuraAlmacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-142-05
x 500g :Código: B02-142-06