Lowenstein-Jensen Medio Base.

Es esta una base para la preparación de varios medios destinados al aislamiento, cultivo y diferenciación de micobacterias.


Fundamento
Los nutrientes de este medio basal, más los aportados por el agregado de la mezcla de huevos, constituyen un rico soporte para el crecimiento de una gran variedad de micobacterias. El verde de malaquita inhibe a gran parte de la flora acompañante. Con el agregado de glicerina se estimula el crecimiento de Mycobacterium tuberculosis, aunque gran parte de M. bovis es inhibido. Agregando un 5% de NaCl, se pueden seleccionar micobacterias tolerantes a la sal, como es el caso de M. smegmatis.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Fosfato monopotásico

2.5

Suspender 37,3 g del polvo en 600 ml de agua destilada y agregar 12 ml de glicerina. Calentar agitando continuamente y hervir un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C aproximadamente. Mezclar asépticamente un litro de huevo íntegro, evitando la formación de burbujas de aire y agregar al medio base. Mezclar el huevo y la base hasta uniformar. Distribuir en recipientes estériles adecuados y tapar herméticamente. Colocar los mismos en posición inclinada y coagular a 85-90°C durante 45 minutos.

Sulfato de magnesio

0.24

Citrato de magnesio

0.6

Asparragina

3.6

Harina de papa

30.0

Verde de malaquita

0.4

pH final:4.8 ± 0.1

Siembra
Se recomienda, en procedimientos de rutina, inocular la muestra previamente decontaminada, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubación
A 35-37°C. A los 7 días de incubación, se observa por primera vez si hubo crecimiento. Luego, observar cada semana, hasta un total de 8 semanas.

Resultados
Observar las características morfológicas y la presencia o ausencia de pigmento en las colonias.

Microorganismos

Crecimiento

Características de las colonias

Mycobacterium tuberculosis

Excelente

Grandes, secas, amarillentas, granulares

Mycobacterium avium

Excelente

Lisas, sin pigmentos

Mycobacterium gordonae

Excelente

Lisas

Mycobacterium bovis

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Características del medio
Medio preparado: verde pálido, opaco.


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación

x 100g :Código:  B02-156-05

x 500g :Código:  B02-156-06

Por 3 tubos: B05-156-21