Levine EMB Agar.

Medio adecuado para la búsqueda y diferenciación de bacilos entéricos, a partir de muestras clínicas, aguas servidas, y otros materiales.
Es recomendado por la American Public Health Association, para el análisis microbiológico de productos lácteos y alimentos, y por la USP para la realización de los ensayos límite microbiológicos.


Fundamento
La fórmula original de este medio de cultivo, fue modificada por Levine, eliminando la sacarosa e incrementando la concentración de lactosa, lo que permite una mejor diferenciación de E. coli.
Es un medio selectivo y diferencial, adecuado para el crecimiento de enterobacterias.
La combinación utilizada de eosina y azul de metileno, inhibe el desarrollo de microorganismos Gram positivos y de bacterias Gram negativas fastidiosas, y también, permite diferenciar bacterias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa.
Los microorganismos fermentadores de lactosa, originan colonias de color azulado-negro, con brillo metálico. Las colonias producidas por microorganismos no fermentadores de lactosa son incoloras.
Algunas bacterias Gram positivas (cepas de estafilococos, enterococos) y levaduras, pueden crecer, originando
colonias incoloras y puntiformes.
Este medio de cultivo,es útil para la orientación y no confirmación de especies bacterianas (ya que numerosas cepas de Citrobacter spp. producen colonias con brillo metálico), por lo cual será necesario realizar pruebas bioquímicas, para la identificación de género y especie.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Peptona	10.0	Suspender 37,4 g de polvo por litro de agua destilada, dejar reposar 5 minutos. Calentar a ebullición hasta disolución total. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 121°C.
Lactosa	10.0
Fosfato dipotásico	2.0
Agar	15.0
Eosina	0.4
Azul de metileno	0.065
pH final:7.1 ± 0.2

Siembra
Directa, estriando la superficie.

Incubación
De 18-24 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.


Resultados

Microorganismos	Crecimiento	Características de las colonias
Escherichia coli ATCC 25922	Bueno a excelente	Verdosas con brillo metálico y centro negro azulado
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603	Bueno a excelente	Mucosas, rosa púrpura, confluentes
P. aeruginosa ATCC 27853	Bueno a excelente	Incoloras
Proteus mirabilis ATCC 43071	Bueno a excelente	Incoloras
S. aureus ATCC 25923	Pobre	Incoloras, pequeñas, puntiformes
Enterococcus faecalis ATCC 29212	Pobre	Incoloras, pequeñas, puntiformes
Shigella flexneri ATCC 12022	Bueno a excelente	Incoloras
Salmonella typhimurium ATCC 14028	Bueno a excelente	Incoloras

Características del medio
Medio preparado: color púrpura con tonos verdosos, ligeramente opalescente con un precipitado floculento disperso.
Placas preparadas: color púrpura.
La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de metileno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-104-05	x 500g :Código:  B02-104-06	6 x 50 ml: B04-104-84