Lauril Sulfato Caldo.

Medio recomendado por A.P.H.A. para detección y recuento de coliformes en aguas, aguas residuales y alimentos.

Fundamento
Medio rico en nutrientes, que permite un rápido desarrollo de los microorganismos fermentadores de la lactosa, aún de los fermentadores lentos.
La triptosa es la fuente de nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, las sales de fosfato proveen un sistema buffer, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico
Es un medio selectivo, ya que el lauril sulfato de sodio inhibe el desarrollo de la flora acompañante.
Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas, éste último se evidencia al utilizar las campanas Durham.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Triptosa	20.0	Suspender 35,6 g del polvo en 1 litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos. Calentar a ebullición hasta la disolución total. Distribuir en tubos conteniendo tubos de fermentación. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121°C.
Lactosa	5.0
Cloruro de sodio	5.0
Lauril sulfato de sodio	0.1
Fosfato dipotásico	2.75
Fosfato monopotásico	2.75
pH final: 6.8 ± 0.2

Siembra
Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Probable:
a.- Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración.

Número de tubos	Volumen de la muestra	Volumen de medio	Concentración del medio
3	10 ml	10 ml	Doble
3	1 ml	10 ml	Simple
3	0.1 ml	10 ml	Simple

b.- Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efectuar diluciones seriadas 10^-1, 10^-2 y 10^-3 y sembrar cada dilución por triplicado en medio de cultivo simple concentración. 

Número de tubos	Dilución dela muestra	Volumen de la muestra	Volumen de medio	Concentración del medio
3	10-1	1 ml	10 ml	Simple
3	10-2	1 ml	10 ml	Simple
3	10-3	1 ml	10 ml	Simple

Incubación
Incubar los tubos 24-48 horas a 35-37 °C.

Resultados

Considerar como positivos aquellos tubos que presentan gas.

Microorganismos	Crecimiento	Producción de gas
Enterobacter aerogenes	Bueno a excelente	+
Escherichia coli ATCC 25922	Bueno a excelente	+
Salmonella typhimurium ATCC 14028	Bueno a excelente	-
Staphylococcus aureus ATCC 25923	Inhibido	Inhibido

El resultado del número mas probable se expresa por 100 ml para muestras fluidas y por gramo para muestras sólidas.

Características del medio
Medio preparado: ámbar claro a ligeramente opalescente. Si se conserva en frío, generalmente flocula o forma precipitado.

Almacenamiento:
Si se conserva entre 25-30 ºC o estufa de incubación a 35-37 ºC permanece claro.

Presentación
x 100g :Código:  B02-174-05	x 500g :Código:  B02-174-06