Hektoen Entérico Agar.
Este es un medio ideal para el aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella spp., a partir de heces y alimentos.
Fundamento
El medio de cultivo contiene sales biliares que inhiben el desarrollo de la flora acompañante, y 2 sistemas indicadores: (i) azul de bromotimol y fucsina ácida como indicadores de la fermentación de carbohidratos, y (ii) el citrato de hierro como un indicador de la formación de SH2 a partir del tiosulfato.
El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibición de estos microorganismos por las sales biliares está disminuida por la adición de cantidades relativamente elevadas de peptona y carbohidratos.
El medio de cultivo, permite una buena diferenciación de las colonias e inhibe el desarrollo de algunos coliformes y otras bacterias no fermentadoras de lactosa, facilitando así la identificación de Salmonella y Shigella a partir de la muestra.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Proteosa peptona
12.0
Suspender 76 g del medio deshidratado en un litro de agua destilada. Dejar reposar de 10 a 15 minutos. Calentar y hervir hasta lograr una disolución completa. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Enfriar a 45°C y distribuir en cajas de Petri.
Extracto de levadura
3.0
Sales biliares
9.0
Lactosa
12.0
Sacarosa
12.0
Salicina
2.0
Cloruro de sodio
5.0
Tiosulfato de sodio
5.0
Citrato de hierro y amonio
1.5
Agar
14.0
Azul de bromotimol
0.065
Fucsina ácida
0.1
pH final: 7.5 ± 0.2
Siembra
Inocular la muestra en superficie, tratando de extender el inóculo para obtener colonias aisladas.Incubación
De 18 a 24 horas a 35-37 °C en aerobiosis. Para diferenciar mejor entre Salmonella y Shigella spp., incubar 48 horas.
Resultados
Microorganismos
Colonias
Shigella flexneri ATCC 12022
Verdes, elevadas, húmedas
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Verde-azuladas, con o sin centro negro
Proteus mirabilis ATCC 43071
Verde-azuladas, con o sin centro negro
Escherichia coli ATCC 25922
Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por un precipitado biliar
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosa salmón rodeadas en algunas ocasiones por un precipitado biliar
Características del medio
Medio preparado: color verde.Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-110-05
x 500g :Código: B02-110-06