GC Agar Base.

Medio de cultivo empleado como medio basal para la preparación del medio Thayer-Martin original o modificado, y como agar chocolate con o sin enriquecimiento.
Es útil para la recuperación de N. gonorrhoeae, N. meningitidis y otros microorganismos exigentes en sus requerimientos culturales.


Fundamento
Es un medio altamente nutritivo. La pluripeptona (es una mezcla en partes iguales de peptona de carne y peptona de caseína) es la fuente de nutrientes para el desarrollo de microorganismos, el almidón soluble absorbe sustancias tóxicas indeseables para el desarrollo de ciertos microorganismos, las sales de fosfato forman un sistema buffer y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Este medio de cultivo, puede ser suplementado con otros nutrientes o con antimicrobianos, lográndose un medio mas enriquecido o selectivo según el aditivo.
El agar base GC, en combinación con hemoglobina y el suplemento estéril de enriquecimiento Britalex (B03-600-21), se usa para el aislamiento de microorganismos exigentes.
Si se desea un medio selectivo para N. gonorrhoeae, se puede además añadir mezcla antimicrobiana VCNT (B03-605-21) para inhibir el desarrollo de microorganismos Gram positivos y Gram negativos, excepto N. gonorrhoeae.

Fórmula (en gramos por litro)
Pluripeptona	15.0
Almidón soluble	1.0
Fosfato dipotásico	4.0
Fosfato monopotásico	1.0
Cloruro de sodio	5.0
Agar	15.0
pH final:7.2 ± 0.2

Instrucciones
Preparar agar base GC doble concentración, suspendiendo 8,2 g del polvo en 100 ml de agua destilada usando un erlenmeyer de 500 ml. (Si a partir del medio deshidratado se desea preparar Thayer Medio modificado, es necesario agregar 1 g de agar y 0,3 g de glucosa.) Mezclar suavemente. Calentar con agitación periódica y dejar hervir durante un minuto para asegurar la disolución completa del medio. Suspender 2 g de hemoglobina en polvo en 100 ml de agua destilada de la siguiente manera: mezclar 2 g de hemoglobina con 2 o 3 ml de agua destilada caliente hasta la formación de una pasta uniforme. Agregar gradualmente y agitando agua destilada hasta completar los 100 ml, quedando así una solución homogénea. Esterilizar el Agar Base GC y la hemoglobina al 2% por autoclave 15 minutos a 121°C. Enfriar las soluciones estériles a 50°C. Luego, según el medio de cultivo que se desee preparar, proceder de la siguiente manera:

-Para preparar el medio de cultivo Thayer Martin: reconstituir el Britalex y el V.C.N.T. agregando 2.1 ml de solvente estéril a cada frasco ampolla. Adicionar asépticamente la solución de hemoglobina, 1 ampolla de V.C.N.T. y otra de Britalex al medio base GC doble concentración; mezclar suavemente y distribuir en placas de Petri u otros recipientes estériles.

-Para preparar agar chocolate: agregar al medio base GC doble concentración,el suplemento Britalex reconstituido con 2.1 ml de solvente estéril y la solución de hemoglobina, mezclar suavemente y distribuir en placas de Petri u otros recipientes estériles.

Siembra
Directa, sobre la superficie del medio de cultivo.

Incubación
El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerá del microorganismo que se quiera aislar.

Resultados
De acuerdo al protocolo del CDC el control de calidad del medio Thayer Martin para productores de medios de cultivo el ensayo que efectúa Laboratorios Britania, es el siguiente:

a-Cultivos para demostrar inhibición del crecimiento por los antimicrobianos presentes en el medio:
“GC Agar Base suplementado con Hemoglobina 2%, VCNT y Britalex”: 

Microorganismos	Crecimiento
N. gonorrhoeae ATCC 49226	Bueno-excelente
N. meningitidis	Bueno-excelente
P. mirabilis ATCC 43071	Inhibición total o parcial
E. coli ATCC 25922	Inhibición total o parcial
S. epidermidis ATCC 14990	Inhibición total o parcial
N. sicca	Inhibición total o parcial
C. albicans ATCC 10231	Inhibición parcial

 b-Cultivos para demostrar crecimiento:
“GC Agar Base suplementado con Hemoglobina 2% y Britalex”:

Microorganismos	Crecimiento
P. mirabilis ATCC 43071	Bueno-excelente
E. coli ATCC 25922	Bueno-excelente
S. epidermidis ATCC 14990	Bueno-excelente
C. albicans ATCC 10231	Bueno-excelente
N. gonorrhoeae ATCC 49226	Bueno-excelente
N. meningitidis	Bueno-excelente
H. influenzae ATCC 49247	Bueno-excelente

Características del medio
Medio preparado: color chocolate.


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-157-05	x 500g :Código:  B02-157-06