Fenilalanina Agar.

Medio de cultivo utilizado para diferenciar Morganella morganii biogrupo 1 y 2, Proteus spp. y Providencia spp., de la mayoría de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae, en base a la presencia de la enzima fenilalanina deaminasa.


Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de levadura aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.
El aminoácido fenilalanina sufre la desaminación oxidativa catalizada por la enzima fenilalanina deaminasa (es una flavoproteína), para producir ácido fenilpirúvico y amoníaco. La presencia del ácido fenilpirúvico se demuestra con el agregado de cloruro férrico en medio ácido, con el cual se forma un quelato de color verdoso entre el ácido fenil pirúvico y los iones Fe³⁺.
Además, en este medio se suele poner en evidencia la producción de pigmentos melánicos, como en el caso de Morganella morganii, Pseudomonas aeruginosa, etc.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Extracto de levadura	3.0	Suspender 23 g del polvo en un litro de agua destilada. Calentar a ebullición hasta disolución total. Colocar en tubos y esterilizar a 121°C durante 15 minutos. Solidificar en posición inclinada para obtener picos de flauta alargados.
DL-Fenilalanina	2.0
Fosfato disódico	1.0
Cloruro de sodio	5.0
Agar	12.0
pH final: 7.3 ± 0.2

Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, sembrar un inóculo denso estriando la superficie del medio.

Incubación
Incubar de 18 a 24 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.

Luego, se debe realizar el revelado: agregar unas gotas de una solución acuosa de cloruro férrico al 10% (código B15-504-61).

Resultados
El análisis de los resultados debe realizarse dentro de los primeros 5 minutos.

Positivo: desarrollo de color verde pálido a intenso en el pico de flauta y en el líquido de condensación.

Negativo: sin cambios de color. El medio permanece amarillo debido al color del reactivo cloruro férrico.

Microorganismo	Fenialanina Deaminasa	Color del pico de flauta y/o líquido de condensación
Proteus mirabilis ATCC 43071	Positivo	Verde
Providencia spp.	Positivo	Verde
Morganella morganii	Positivo	Verde
E. coli ATCC 25922	Negativo	Amarillo
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603	Negativo	Amarillo

Limitaciones
No se recomienda realizar la lectura de la prueba después de los 5 minutos, debido a que disminuye la intensidad del color verde.


Características del medio
Medio preparado: amarillo ámbar.


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-127-05	x 500g :Código:  B02-127-06