E. C. Medio.
Medio utilizado para el recuento de coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli en agua, alimentos y otros materiales.
Fundamento
El contenido de lactosa en este medio, favorece el crecimiento de bacterias lactosa positivas, mientras que las sales biliares inhiben el crecimiento de gran parte de la flora acompañante. Este caldo es recomendado por el Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (1975), y por Hajna y Perry (1943), para el recuento de coliformes en alimentos.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Tripteína
20.0
Suspender 37,4 g del medio en un litro de agua destilada. Calentar hasta su total disolución. Distribuir en tubos de ensayo que contengan campanitas de Durham. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121°C.
Lactosa
5.0
Sales biliares N° 3
1.9
Fosfato dipotásico
4.0
Fosfato monopotásico
1.5
Cloruro de sodio
5.0
pH final: 6.9 ± 0.2
Siembra
Para recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Probable:
a.- Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por triplicado: 10 ml en caldo doble concentración y 1ml y 0,1 ml en caldo simple concentración.
Número
de tubosVolumen de la muestra
Volumen de medio
Concentración
del medio3
10 ml
10 ml
Doble
3
1 ml
10 ml
Simple
3
0.1 ml
10 ml
Simple
b- Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos), efectuar diluciones seriadas 10-1, 10-2 y 10-3 y sembrar cada dilución por triplicado en medio de cultivo simple concentración.
Número
de tubosDilución dela muestra
Volumen de la muestra
Volumen de medio
Concentración
del medio3
10-1
1 ml
10 ml
Simple3
10-2
1 ml
10 ml
Simple
3
10-3
1 ml
10 ml
Simple
Incubación
Incubar los tubos 24-48 horas a 35-37 °CResultados
Se consideran resultados positivos el crecimiento bacteriano y producción de gas.
Microorganismos
Crecimiento
Producción de gas
Enterobacter aerogenes
Bueno a excelente
+
Escherichia coli ATCC 25922
Bueno a excelente
+
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Bueno a excelente
-
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inhibido
Inhibido
El resultado del número mas probable se expresa por 100 ml para muestras fluidas y por gramo para muestras sólidas
Características del medio:
Caldo preparado: ámbar.Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-168-05
x 500g :Código: B02-168-06