Columbia Agar Base.

Es una excelente base para el crecimiento de microorganismos exigentes y para la buena visualización de hemólisis con el agregado de sangre.


Fundamento
Este medio combina las virtudes de la peptona, de la tripteína, del extracto de levadura y del extracto de corazón, que favorecen el desarrollo de microorganismos exigentes y la obtención de colonias eugónicas. El almidón incrementa el desarrollo de neisserias y las reacciones de hemólisis de algunos estreptococos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el agar es el agente solidificante.
Tiene la ventaja de permitir el agregado de sangre, o de antibióticos entre otras cosas, obteniéndose así, un medio mas enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo. Es la base del agar sangre, agar chocolate y también puede usarse como base para el medio Thayer Martin.
Con el agregado de 5-10 % de sangre (de carnero, de caballo), se logra una buena observación de las reacciones hemolíticas. Si se calienta el agar sangre durante 10 minutos a 80 ºC, en baño maría, se transforma en agar chocolate y así se logra un medio ideal para el aislamiento de Haemophilus influenzae y neisserias patógenas.
Para aislar microorganismos Gram positivos, puede agregarse 10 mg de colistina y 15 mg de ácido nalidíxico por litro de medio base. Este medio suplementado con antibióticos es conocido como HV o CoNa y se usa para el aislamiento de Gardnerella vaginalis.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Peptona	5.0	Suspender 42,5 g de polvo por litro de agua destilada. Calentar con agitación frecuente y hervir durante un minuto. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Tripteína	12.0
Extracto de levadura	3.0
Extracto de corazón	3.0
Almidón soluble	1.0
Cloruro de sodio	5.0
Agar	13.5
pH final:7.3 ± 0.2

Siembra
En superficie, estriar directamente, a partir de los distintos materiales.

Incubación
El tiempo, la temperatura y la atmósfera de incubación dependerá del microorganismo que se quiera aislar.

Resultados

Microorganismos	Crecimiento	Hemólisis
E. coli ATCC 25922	Abundante	--
S. aureus ATCC 25923	Abundante	Beta
S. pyogenes ATCC 19615	Abundante	Beta
S. pneumoniae ATCC 6305	Abundante	Alfa

Limitaciones
-Las reacciones hemolíticas de muchos microorganismos son diferentes al usar sangre de caballo respecto a la sangre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estreptococos grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suplementado con sangre de caballo pero no en agar suplementado con sangre de carnero, y son mal clasificados como Estreptococos Grupo A al usar sangre de caballo.

Características del medio
Medio preparado: ámbar claro.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-111-05	x 500g :Código:  B02-111-06	6 x 50 ml: B04-111-84