Clostridios Agar Diferencial para.

Medio utilizado para el cultivo y recuento de colonias de Clostridios sulforreductores en alimentos.

Fundamento
El medio de cultivo es altamente nutritivo y permite un adecuado desarrollo bacteriano. El almidón promueve la esporulación de la bacteria, la resazurina es el indicador redox que vira al color rojo a altos potenciales de oxido-reducción, indicando condiciones aeróbicas. La cisteína es el agente reductor y el sulfito de sodio y el citrato de hierro se usan como sistema indicador de la reducción de sulfito por los clostridios sulforreductores. Por reducción del sulfito se genera SH₂ , el cual reacciona con los iones Fe³⁺ y se forma un precipitado de color negro.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Tripteína	5.0	Suspender 43.3 g del polvo por litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar con agitación frecuente y hervir un minuto. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 121 ºC. Es aconsejable usar el mismo día de la preparación.
Peptona de carne	5.0
Extracto de carne	8.0
Almidón soluble	1.0
Glucosa	1.0
Extracto de levadura	1.0
Clorhidrato de cisteína	0.5
Citrato de hierro y amonio	1.0
Sulfito de sodio	0.75
Resazurina	0.002
Agar	20.0
pH final: 7.6 ± 0.2

Siembra
Para favorecer la esporulación de la bacteria y eliminar la flora competitiva, se recomienda realizar un tratamiento por calor a la muestra: 10 minutos a 80 ºC. Este debe ser realizado antes de inocular el agar.
Sembrar mediante la técnica de Pour Plate: 1 ml de la muestra y añadir 15ml de medio de cultivo fundido y enfriado a 45-50 ºC. Mezclar por rotación.
Luego de la solidificación del medio de cultivo, agregar una capa con el mismo agar estéril enfriado a 45 ºC.

Incubación
En anaerobiosis, a 30 ºC durante 3 días

Resultados

Microorganismos	Crecimiento	Colonias negras
Clostridium perfringens	Bueno	+
Clostridium sporogenes	Bueno	+

Características del medio:
Medio preparado: ámbar, amarillento


Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-202-05	x 500g :Código:  B02-202-06