Christensen Medio (Urea Agar Base).

Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad ureásica.
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras enterobacterias y estafilococos.


Fundamento
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentación de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan lentamente la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Tripteína

1.0

Suspender 24 g de polvo en 950 ml de agua destilada. Dejar reposar 2 minutos. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C y agregar 50 ml de una solución de urea al 40% previamente esterilizada por filtración o cloroformo. Fraccionar en tubos de hemólisis y solidificar en pico de flauta con fondo profundo.

Glucosa

1.0

Cloruro de sodio

5.0

Fosfato monopotásico

2.0

Rojo de fenol

0.012

Agar

15.0

pH final: 6.8 ± 0.2

Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, estriar la superficie del pico de flauta. Algunos microorganismos pueden requerir mayor tiempo de incubación.
Se recomienda no punzar la capa profunda para controlar el color.


Incubación
En aerobiosis, durante 24-48 horas a 35-37 °C.


Resultados

Microorganismo

Actividad ureásica

Color del medio

Proteus mirabilis ATCC 43071

Positiva

Rojo-Rosado

K. pneumoniae ATCC 700603

Positiva débil

Rojo-Rosado

Escherichia coli ATCC 25922

Negativa

Amarillo

S. flexneri ATCC 12022

Negativa

Amarillo

S. typhimurium ATCC 14028

Negativa

Amarillo

Limitaciones
-Bacterias que hidrolizan lentamente la urea, como ser Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter, viran al color rojo-rosado de todo el medio de cultivo luego de varios días de incubación.
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone facilmente.

Características del medio
Medio preparado: amarillo


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación 

x 100g :Código:  B02-109-05

x 500g :Código:  B02-109-06