Brucella Agar Base.
Medio recomendado para el aislamiento y cultivo de Brucella spp.
Con la adición de sangre, el medio se usa para el aislamiento y cultivo de Brucella spp. y de microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes, a partir de una gran variedad de muestras clínicas. También es útil para observar reacciones de hemólisis.
Fundamento
La Brucelosis, es una zoonosis, y puede ser transmitida por contacto directo con animales infectados, o a través de carnes y productos lácteos.
En el medio de cultivo, la tripteína, la peptona de carne y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrógeno,carbono, aminoácidos, vitaminas, minerales y cofactores necesarios para el crecimiento de microorganismos. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y el bisulfito de sodio favorece el desarrollo microbiano. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico del medio.
El agregado de sangre al medio de cultivo, aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano, y permite detectar hemólisis.
Este medio, puede ser también selectivo, si es suplementado con antibióticos, ej: Bacitracina 25.000 U/l, Polimixina B 6.000 U/l, cicloheximida 100 mg/l.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Tripteína
10.0
Suspender 43 g del polvo en 1 litro de agua destilada. Mezclar vigorosamente, calentar con agitación frecuente y hervir durante 1 minuto para disolver el polvo. Esterilizar por autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
Nota: si se quiere suplementar con sangre, agregarla asépticamente, al medio de cultivo estéril, fundido y enfriado a 45-50 ºC.Peptona de carne
10.0
Glucosa
1.0
Extracto de levadura
2.0
Cloruro de sodio
5.0
Bisulfito de sodio
0.1
Agar
15
pH final: 7.0 ± 0.2
Siembra
Por inoculación directa del material en estudio, sobre la superficie del medio de cultivo.Incubación
A 35-37 ºC, hasta 72 horas, en atmósfera con 5-10 % CO2.Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Hemólisis
B. abortus ATCC 11192
Moderado-Abundante
--
S. aureus ATCC 25923
Abundante
Beta
S. pyogenes ATCC 19615
Abundante
Beta
S. pneumoniae ATCC 6305
Abundante
Alfa
S. pneumoniae ATCC 49619
Abundante
Alfa
Limitaciones
Las reacciones hemolíticas de muchos microorganismos son diferentes al usar sangre de caballo respecto a la sangre de carnero, tal es el caso de algunas cepas de estreptococos grupo D, que producen beta hemólisis en el agar suplementado con sangre de caballo pero no en agar suplementado con sangre de carnero, y son mal clasificados como Estreptococos Grupo A al usar sangre de caballo.Características del medio
Medio preparado: ámbar.
Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-196-05
x 500g :Código: B02-196-06