Acetato Diferencial Agar.

Medio de cultivo usado para determinar la capacidad de ciertos microorganismos de utilizar acetato como única fuente de carbono. Es especialmente útil para diferenciar Escherichia coli de Shigella spp.

Fundamento
El acetato diferencial agar, es un medio de cultivo que contiene una mezcla de sales en la cual, el acetato de sodio es la única fuente de carbono. No posee azúcares ni tampoco inhibidores del crecimiento bacteriano. Fue desarrollado por Trabulsi y Ewing, quienes reemplazaron el citrato de sodio presente en el medio basal de Citrato de Simmons, por acetato de sodio.
Un microorganismo que es capaz de usar acetato como su única fuente de carbono, utiliza también las sales de amonio como su única fuente de nitrógeno. Debido a la utilización de sales de amonio, se libera amoníaco, que alcaliniza el medio, y esto produce un viraje del indicador azul de bromotimol del color verde al color azul.
La mayoría de las enterobacterias utilizan el acetato como única fuente de carbono, excepto Shigella spp., Proteus spp., y Providencia spp.
Escherichia coli y Shigella spp., son enterobacterias que presentan gran homología entre sí, y este medio de cultivo es útil para diferenciarlas, especialmente a Escherichia coli,biotipo A-D, inmóvil, anaerogénico, de Shigella spp.

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Acetato de sodio	2.0	Suspender 24.1 gramos de polvo en un litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos. Mezclar calentando hasta ebullición durante 1 a 2 minutos. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar y dejar solidificar en posición inclinada (pico de flauta).
Sulfato de magnesio	0.2
Cloruro de sodio	5.0
Fosfato de amonio	1.0
Fosfato dipotásico	1.0
Azul de bromotimol	0.08
Agar	14.8
pH final: 6.8 ± 0.2

Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, usando técnica aséptica, tomar unas colonias y hacer una suspensión en 1 mililitro de solución fisiológica.
Transferir una ansada de la suspensión y estriar la superficie del medio de cultivo.

Incubación
Incubar en aerobiosis, a 35-37 ºC hasta 7 días.

Resultados
Positivo: crecimiento bacteriano con viraje del indicador hacia el color azul.
Negativo: el medio de cultivo permanece verde, sin desarrollo ni cambio de color.

Microorganismos	Crecimiento	Apariencia
E. coli ATCC 25922	Bueno a excelente	Azul
K. pneumoniae ATCC 700603	Bueno a excelente	Azul
S. typhimurium ATCC 14028	Bueno a excelente	Azul
S. flexneri ATCC 12022	Pobre a bueno	Verde

Características del medio
Medio deshidratado: color verdoso claro, homogéneo, libre desplazamiento.
Medio preparado: color verde.

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación
x 100g :Código:  B02-206-05	x 500g :Código:  B02-206-06